文献情報
文献番号
201427027A
報告書区分
総括
研究課題名
医薬品の微生物学的品質確保のための高度試験法導入に関する研究
課題番号
H24-医薬-指定-022
研究年度
平成26(2014)年度
研究代表者(所属機関)
棚元 憲一(武蔵野大学 薬学部)
研究分担者(所属機関)
- 山口 進康(大阪大学大学院 薬学研究科)
- 片山 博仁(バイエル薬品株式会社 プロダクトサプライジャパン本部)
研究区分
厚生労働科学研究費補助金 健康安全確保総合研究分野 【補助金】 医薬品・医療機器等レギュラトリーサイエンス総合研究
研究開始年度
平成24(2012)年度
研究終了予定年度
平成26(2014)年度
研究費
2,800,000円
研究者交替、所属機関変更
-
研究報告書（概要版）
研究目的
日本薬局方には医薬品の微生物学的品質確保のためいくつかの微生物試験法が規定されているが、これらの試験法は随時科学の進歩、国際的な変化に歩調を合わせて改善もしくは新規試験法の導入を図らなければならない。そのような観点から本研究では、①遺伝子組換え体を用いた新規エンドトキシン測定用試薬の開発、②細菌数迅速測定法のバリデーションにかかる基盤データの構築、③無菌医薬品品質確保のための製造と管理の技術に関する研究、の3研究を行うことを目的とした。
研究方法
①では、開発品につき、各種エンドトキシン及び類縁物質との反応性を既存リムルス試薬と比較検討し、さらに薬局方収載注射剤、生物学的製剤、医療機器に対する適用性を標準エンドトキシンの添加回収率を指標に評価した。②では、日本薬局方微生物関連試験（微生物限度試験および無菌試験）に用いる溶解剤や中和剤が難染色性の緑膿菌の蛍光染色に与える影響を検討した。③では無菌医薬品の品質を確保するための消毒剤の有効性を評価する方法として「硬質表面キャリアー法」が実用可能であることを確認することを目的に、実施する基礎実験で使用する回収液の組成を検討した。
結果と考察
本年度は組換えエンドトキシン比色試薬を分析法バリデーションに従い、既存エンドトキシン測定試薬との間での同等性を評価し、組換え試薬が薬局方エンドトキシン試験法に適用可能であることを確認した。また、非無菌医薬品の微生物管理における生菌数迅速測定プロトコールの作成のために、代表的な非無菌製剤原料（水溶性基剤、油脂製基剤、乳剤性基剤）への細菌数迅速測定法の適用を検討した。また、検討を行った各前処理条件を用いて、非無菌製剤原料の生菌数を蛍光活性染色法により測定し、従来の培養法により得られた生菌数と比較することにより、蛍光活性染色法の有用性を確認した。さらに、製薬関連企業15社における共同実験により、「硬質表面キャリアー法」が消毒剤の有効性を的確に評価する方法として実用可能な方法であることが確認し、日本薬局方参考情報「微生物殺滅法」の改訂案を作成した。
結論
組換え試薬の各種Et のUSPRSEに対する相対活性はライセート試薬のそれと良く相関した。また、第十六改正日本薬局方の医薬品各条にEt規格値が記載される医薬品は組換え試薬で全て測定が可能であった。よって組換え技術を用いて作製された原料から調製された組換え試薬は、カブトガニ由来の原料から調製されたライセート試薬と同様、薬局方のエンドトキシン試験に使用可能である。
今回の研究では、非無菌医薬品の微生物管理における生菌数迅速測定プロトコールの作成のために、代表的な非無菌製剤原料（水溶性基剤、油脂製基剤、乳剤性基剤）への細菌数迅速測定法の適用を検討し、プロトコールを作成した。また、検討を行った各前処理条件を用いて、非無菌製剤原料の生菌数を蛍光活性染色法により測定し、従来の培養法により得られた生菌数と比較することにより、蛍光活性染色法の有用性を確認した。
本研究で得られた蛍光活性染色による各種非無菌製剤原料中の生菌数測定法を、今後、様々な医薬品原料や原薬、医薬品添加物、製剤に対して行うことにより、医薬品に対する迅速かつ高精度な生菌数測定が可能になり、ヨーロッパ薬局方、米国薬局方に対して、日本からの新たな微生物試験法に関する情報発信を行うことが可能になるものと考えられる。
日本薬局方 参考情報 「微生物殺滅法」の改訂案に消毒剤の有効性を評価する方法として掲載される予定の「硬質表面キャリアー法」が実用可能であることを確認するために製薬関連企業15社にて共同実験を実施した。その結果、「硬質表面キャリアー法」は実用可能な方法であることが確認できた。また本書において、実施時における懸念事項も紹介し，注意点も含めた対応策を明確にしたことで、更に各社における実施を容易にする材料となることが示唆された。
今回の研究では、非無菌医薬品の微生物管理における生菌数迅速測定プロトコールの作成のために、代表的な非無菌製剤原料（水溶性基剤、油脂製基剤、乳剤性基剤）への細菌数迅速測定法の適用を検討し、プロトコールを作成した。また、検討を行った各前処理条件を用いて、非無菌製剤原料の生菌数を蛍光活性染色法により測定し、従来の培養法により得られた生菌数と比較することにより、蛍光活性染色法の有用性を確認した。
本研究で得られた蛍光活性染色による各種非無菌製剤原料中の生菌数測定法を、今後、様々な医薬品原料や原薬、医薬品添加物、製剤に対して行うことにより、医薬品に対する迅速かつ高精度な生菌数測定が可能になり、ヨーロッパ薬局方、米国薬局方に対して、日本からの新たな微生物試験法に関する情報発信を行うことが可能になるものと考えられる。
日本薬局方 参考情報 「微生物殺滅法」の改訂案に消毒剤の有効性を評価する方法として掲載される予定の「硬質表面キャリアー法」が実用可能であることを確認するために製薬関連企業15社にて共同実験を実施した。その結果、「硬質表面キャリアー法」は実用可能な方法であることが確認できた。また本書において、実施時における懸念事項も紹介し，注意点も含めた対応策を明確にしたことで、更に各社における実施を容易にする材料となることが示唆された。
公開日・更新日
公開日
2015-06-01
更新日
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