非定型溶血性尿毒症症候群の診断法と治療法の確立

文献情報

• 文献番号: 201128276A
• 報告書区分: 総括
• 研究課題名: 非定型溶血性尿毒症症候群の診断法と治療法の確立
• 課題番号: H23-難治・一般-121
• 研究年度: 平成23(2011)年度
• 研究代表者(所属機関): 藤村 吉博(奈良県立医科大学 医学部)

研究分担者(所属機関)

• 宮田　敏行(国立循環器病研究センター研究所　分子病態部)
• 松本　雅則(奈良県立医科大学　医学部)

• 研究区分: 厚生労働科学研究費補助金 疾病・障害対策研究分野 難治性疾患克服研究
• 研究開始年度: 平成23(2011)年度
• 研究終了予定年度: 平成23(2011)年度
• 研究費: 4,500,000円
• 研究者交替、所属機関変更: -

研究報告書（概要版）

研究目的

溶血性尿毒症症候群（HUS）の約90%は腸管出血性病原性大腸菌への感染を契機に発症し下痢を伴うが、約10%は下痢を伴わず非定型（atypical, a）HUSと呼ばれる。最近aHUSの原因の多くはH因子（FH）に代表される補体調節因子の遺伝子異常によることが欧米で数多く報告される一方で、本邦におけるaHUS病態解析はほとんど行われていない。奈良医大輸血部では1998年よりTMA（血栓性微小血管障害症）患者の診断、登録を行っており、その中で家族性や症状反復性等から先天性aHUSと考えられる症例を同定した。本研究は、これら患者について解析を行うことで本邦aHUSの病態を明らかにし、症例に応じた適切な治療法の選択が可能となることを目的とする。

研究方法

a)対象症例
2011年末までに先天性aHUS疑診例として同定した31家系48症例、さらに2012年に新規に依頼を受けた7例について、同意を得られた症例から順次解析を行った。

b）解析方法
FHに焦点を当てたタンパク質レベルでの解析として、１）ヒツジ赤血球を用いた溶血試験、２）FH添加による溶血補正試験、３）抗FH抗体スクリーニングを奈良医大輸血部にて行った。これら解析による異常部位のスクリーニングの後に、遺伝子レベルでの解析として6種類の補体調節因子（FH, MCP, FI, TM, C3, FB）の網羅的遺伝子解析を国立循環器病研究センターにて行った。

結果と考察

本年度新たに採血できた21例のうち、5例で明らかな溶血の亢進を認め、5例に軽度の溶血亢進を認めた。溶血亢進を認めた症例のうち、2症例でFH遺伝子に変異（R1215Q）を、溶血亢進が認められなかった5症例でC3遺伝子に変異（I1157TとS562L）を同定した。本結果より、溶血試験の結果から異常部位を推測し、遺伝子解析を行うという一連の解析方法が有用であることが確認できた。

結論

奈良医大輸血部のTMAデータベースより、32家系55症例のaHUS疑診患者を同定した。これら症例についてFHを中心とした補体調節因子の解析をタンパク質レベルと遺伝子レベルで行った。その結果、１家系2症例にFH遺伝子異常を、2家系5症例にC3遺伝子変異を同定することができた。本研究を継続することで多数の本邦aHUS症例における臨床所見と遺伝子異常の関連が明らかとなり、現在まで不明であった病態が明らかとなる可能性が高い。

公開日・更新日

• 公開日: 2013-03-28
• 更新日: -

行政効果報告

• 文献番号: 201128276C

成果

• 専門的・学術的観点からの成果: 奈良医大輸血部でのタンパク質レベルでの解析により、FH異常を中心としたaHUS診断のスクリーニングが可能となった。さらに国立循環器病研究センターの遺伝子レベルでの解析の確立により、aHUS患者の遺伝子背景が明らかとなり、さらに本邦におけるaHUS症例数などの情報も正確に把握できるようになった。またRestriction Fragment Length Polymorphism（RFLP）法の確立により、今回同定された遺伝子変異を簡便にスクリーニングすることが可能となった。
• 臨床的観点からの成果: 日本国内では従来、aHUSの診断に特異的な検査が実施できなかったため、血漿交換などのaHUSに対する治療開始の判断が困難であったが、本研究で確立した溶血試験などの結果により早期に治療が開始され、予後の改善が期待できる。また、現在までに同定された遺伝子変異の多くは欧米からの報告と同じであり、日本人における治療も海外と同様の方法で効果が得られることが期待される。
• ガイドライン等の開発: aHUS診断基準作成のため日本腎臓学会と日本小児科学会が共同でaHUS診断基準作成ワーキンググループを設立し、現在、診断基準作成に向けての活動を進めている。このワーキンググループに研究代表者である藤村吉博がオブザーバーとして参加して、本研究の成果を活用している。
• その他行政的観点からの成果: 特記事項なし。
• その他のインパクト: 2011年7月23日－28日に京都国際会議場にて開催された第57回国際血栓止血学会（ISTH）のSatellite symposium（aHUS）にて、本研究班の代表者である藤村吉博を座長とし、研究分担者である松本雅則、研究協力者である吉田瑶子が本研究班の成果について報告を行った。

発表件数

• 原著論文（和文）: 0件
• 原著論文（英文等）: 10件
• その他論文(和文): 10件
• その他論文(英文等): 3件
• 学会発表(国内学会): 27件
• 学会発表(国際学会等): 4件
• その他成果(特許の出願): 0件 ; 「出願」「取得」計0件
• その他成果(特許の取得): 0件
• その他成果(施策への反映): 0件
• その他成果(普及・啓発活動): 0件

主な原著論文20編（論文に厚生労働科学研究費の補助を受けたことが明記された論文に限る）

• 原著論文1: Akiyama R, Matsumoto M, Fujimura Y, et al.; H1N1 influenza (swine flu)-associated thrombotic microangiopathy with a markedly high plasma ratio of von Willebrand factor to ADAMTS13.; Intern Med. , 50 (6) , 643-647 (2011)
• 原著論文2: Yamaguchi Y, Matsumoto M, Fujimura Y, et al.; Epitope analysis of autoantibodies to ADAMTS13 in patients with acquired thrombotic thrombocytopenic purpura.; Thromb Res. , 128 (2) , 169-173 (2011)
• 原著論文3: Takaya H, Matsumoto M, Fujimura Y, et al.; ADAMTS13 activity may predict the cumulative survival of patients with liver cirrhosis in comparison with the Child-Turcotte-Pugh score and the MELD score.; Hepatol Res. , 42 (5) , 459-472 (2012)
• 原著論文4: Koyama N, Matsumoto M, Fujimura Y, et al.; Reduced larger VWF multimers at dawn in OSA plasmas reflect severity of apneic episodes. (in press); Eur Respir J. (2012)
• 原著論文5: Taguchi F, Matsumoto M, Fujimura Y, et al.; The homozygous p.C1024R- ADAMTS13 gene mutation links to a late-onset phenotype of Upshaw - Schulman syndrome in Japan.; Thromb Haemost. , 107 (5) , 1003-1005 (2012)
• 原著論文6: Matsumoto M, Bennett C L, Fujimura Y, et al.; Acquired idiopathic ADAMTS13 activity deficient thrombotic thrombocytopenic purpura in a population from Japan.; PLoS ONE. , 7 (3) (2012)
• 原著論文7: Rybaltowski M, Suzuki Y, Miyata T, et al.; In vivo imaging analysis of the interaction between unusually large von Willebrand factor multimers and platelets on the surface of vascular wall.; Pflugers Arch. , 461 (6) , 623-633 (2011)
• 原著論文8: Kokame K, Sakata T, Miyata T, et al.; von Willebrand factor-to-ADAMTS13 ratio increases with age in a Japanese population.; J Thromb Haemost. , 9 (7) , 1426-1428 (2011)
• 原著論文9: Kokame K, Kokubo Y, Miyata T, et al.; Polymorphisms and mutations of ADAMTS13 in the Japanese population and estimation of the number of patients with Upshaw-Schulman syndrome.; J Thromb Haemost. , 9 (8) , 1654-1656 (2011)

公開日・更新日

• 公開日: 2014-05-22
• 更新日: -

収支報告書

• 文献番号: 201128276Z