孤発性ALSの分子異常を標的とした治療技術の確立 | 厚生労働科学研究成果データベース

文献情報

文献番号

201027086A

報告書区分

総括

研究課題名

孤発性ALSの分子異常を標的とした治療技術の確立

課題番号

H21-こころ・一般-017

研究年度

平成22(2010)年度

研究代表者(所属機関)

郭　伸(東京大学　医学部附属病院)

研究分担者(所属機関)

相澤　仁志(独立行政法人　国立病院機構　東京病院)
村松　慎一(自治医科大学)

研究区分

厚生労働科学研究費補助金疾病・障害対策研究分野障害者対策総合研究

研究開始年度

平成21(2009)年度

研究終了予定年度

平成23(2011)年度

研究費

30,000,000円

研究者交替、所属機関変更

-

研究報告書（概要版）

研究目的

孤発性ALS運動ニューロンでは、グルタミン酸受容体サブタイプであるAMPA受容体のGluR2 サブユニットQ/R 部位でRNA編集が低下しており，これは，同部位の特異的RNA編集酵素であるadenosine deaminase acting on RNA 2 （ADAR2）の活性低下に依ると考えられる．この分子異常は孤発性ALSに疾患特異的分子異常であり，運動ニューロン死の直接原因であることを，ADAR2のコンディショナルノックアウトマウスの解析から明らかにした．本研究では，ADAR2活性の正常化が孤発性ALSの治療につながると考えられるので、ADAR2活性賦活によるALS治療の基盤技術の確立を目的とする.

研究方法

我々が開発したTetHeLaG2m細胞を様々な化学物質に暴露し，ADAR2活性を賦活する物質を市販薬およびUS Drug Collectionから探索した。このスクリーニングにより得られた候補物質を野生型マウスに全身投与し，運動ニューロンにおけるADAR2活性賦活作用を検討した．また，ADAR2 遺伝子治療のためのベクターを開発し、野生型マウスへの経静脈的全身投与によるADAR2 活性賦活作用を検討した。

結果と考察

TetHeLaG2m細胞を用いてADAR2活性賦活する物質を20種類以上得た。これらの作用メカニズムは、ADAR2 mRNA発現量の増加によるもの、ADAR2 mRNA/GluR2 pre-mRNA比の増加によるものの他、これらのADAR2 活性に関連しうる分子には影響を与えないものがあり、異なる分子メカニズムに依ることが明らかになった．一部の薬剤を野生型マウスに投与し、脳・脊髄におけるADAR2 活性を賦活することを確認した。また、ヒトADAR2aをカプシド蛋白及びゲノム配列を修飾したAAVベクターに組み込み、野生型マウス及びモデルマウスへの全身投与により脊髄運動ニューロンへ送達されること、ADAR2遺伝子発現による酵素活性が上昇することを確認した．今後モデル動物を用いた神経細胞死抑制作用を検討し、ADAR2活性賦活による治療技術基盤を確立する。

結論

１）ADAR2活性賦活物質のスクリーニングを進めin vivoでも作用を持つ物質を複数得た．
２）遺伝子治療のための、血管経由により神経細胞へADAR2遺伝子導入可能なベクターの開発を進め、運動ニューロンにおけるADAR2活性の賦活を確認した．