文献情報
文献番号
201027060A
報告書区分
総括
研究課題名
ニューロパチーの病態解明に関する研究
課題番号
H20-こころ・一般-014
研究年度
平成22(2010)年度
研究代表者(所属機関)
高嶋 博(鹿児島大学 大学院医歯学総合研究科)
研究分担者(所属機関)
- 田中 章景(名古屋大学 大学院医学系研究科)
- 滋賀 健介(京都府立医科大学)
研究区分
厚生労働科学研究費補助金 疾病・障害対策研究分野 障害者対策総合研究
研究開始年度
平成20(2008)年度
研究終了予定年度
平成22(2010)年度
研究費
14,000,000円
研究者交替、所属機関変更
-
研究報告書(概要版)
研究目的
我々が開発した遺伝性ニューロパチー診断DNAマイクロアレイチップを用いて、遺伝性ニューロパチーの診断、分子疫学の調査、解析および新規原因遺伝子の同定を目指す。さらに病態を明らかにするため、病理学的、生理学的、臨床症候の特徴に検討する。
研究方法
検査システムを確立するため、DNA Chipによる解析の最適化を行った。ヒトDNAを検体として、PCR増幅し、作成したCMT遺伝子診断チップと反応させ、マイクロアレイシステムで解析する。新規の原因遺伝子同定には、連鎖解析、ゲノムシークエンスを行う。また、各症例に病理学的、電気生理学的を加えた。
結果と考察
遺伝性ニューロパチー診断チップによる遺伝子スクリーニング
CMT診断アレイ実験において、PCRのステップの最適化を行い、586のPCR反応を26本のチューブで増幅することが可能となり、増幅過程が飛躍的に簡素化された。Multiplex PCRを導入し最適化し、実験的には、2日で8アレイまで施行可能となっている。
現在まで475例(コントロール50名含む)のアレイ実験が行われ、CMT症例では、PRX, MFN2, MPZ, GJB1, DNM2などに、AOA2例では、SETXに病的異常が確認された。新規原因遺伝子にも異常が見つかっており、新規原因遺伝子の同定をすべく、変異の確認を行っている。連続症例の検討により、臨床型ごとの頻度が明らかになってきた。
CMT診断アレイ実験において、PCRのステップの最適化を行い、586のPCR反応を26本のチューブで増幅することが可能となり、増幅過程が飛躍的に簡素化された。Multiplex PCRを導入し最適化し、実験的には、2日で8アレイまで施行可能となっている。
現在まで475例(コントロール50名含む)のアレイ実験が行われ、CMT症例では、PRX, MFN2, MPZ, GJB1, DNM2などに、AOA2例では、SETXに病的異常が確認された。新規原因遺伝子にも異常が見つかっており、新規原因遺伝子の同定をすべく、変異の確認を行っている。連続症例の検討により、臨床型ごとの頻度が明らかになってきた。
結論
Charcot-Marie-Tooth病の診断DNA Chip チップは、遺伝子診断に有用であった。本邦のCMTの分子疫学の概要が明らかとなった。
公開日・更新日
公開日
2011-05-30
更新日
-