ＲＮＡ創薬を支援するバイオイメージング技術の確立

文献情報

• 文献番号: 200812040A
• 報告書区分: 総括
• 研究課題名: ＲＮＡ創薬を支援するバイオイメージング技術の確立
• 課題番号: H20-ナノ・若手-007
• 研究年度: 平成20(2008)年度
• 研究代表者(所属機関): 浅井 知浩(静岡県立大学大学院 薬学研究科)
• 研究区分: 厚生労働科学研究費補助金 厚生科学基盤研究分野 医療機器開発推進研究（ナノメディシン研究）
• 研究開始年度: 平成20(2008)年度
• 研究終了予定年度: 平成22(2010)年度
• 研究費: 5,000,000円
• 研究者交替、所属機関変更: -

研究報告書（概要版）

研究目的

　small interfering RNA（siRNA）の医療応用を促進するには、疾患部位に必要量のsiRNAを送達することを目的とした核酸デリバリーシステムの開発が鍵になる。これまでsiRNAベクターの体内動態は詳細に解析されてきたが、主薬であるsiRNA本体の体内動態は未知のことが多い。そこで本研究ではsiRNAの体内動態を非侵襲的、リアルタイムかつ高感度に解析する技術の確立を目的とし、siRNAの18Fポジトロン標識体の開発ならびにポジトロン断層法（PET）による動態解析技術の構築を目指した。

研究方法

　本年度は、siRNAポジトロン標識体の開発、LC/ESI-TOF-MSを用いたsiRNA分析方法の確立、およびsiRNA体内動態の蛍光インビボイメージングについて重点的に検討し、実際にsiRNA体内動態のPET解析に着手した。

結果と考察

　まず本研究に用いるsiRNAの配列、ポジトロン標識部位、siRNAとポジトロンの結合様式等の設計を行った。次に、標識siRNAの分析条件を確立し、ポジトロン標識siRNAの分取に成功した。この標識siRNAが合成中に分解を受けていないことを電気泳動にて確認した。実際に調製したポジトロン標識siRNAをマウスに静脈内投与し、その体内動態のPET解析を実施した。その結果、siRNA単体とリポソームに搭載したsiRNAの体内動態の差異をイメージングすることに成功した。
　一方、主薬であるsiRNAと運搬体であるベクターの体内動態が一致しているか否かを評価していくうえで、リポソームベクターのPET動態解析方法について検討した。我々が開発したポジトロン標識プローブを用いてリポソームを放射標識し、PETを用いてその体内動態を解析した。また、PET解析データの検証に有用であると考えられる蛍光インビボイメージング法を利用し、蛍光標識siRNAの体内動態を解析した。リポソームに搭載したAlexa750標識siRNAをマウスに投与し、その体内動態を解析した。

結論

　当初の計画に沿って研究事業を遂行し、siRNA体内動態のPET解析技術の確立に向けて着実な研究成果が得られた。siRNAの体内動態に関して有益な情報が得られれば、RNA創薬の開発効率を高め、創薬の加速化に繋がると期待される。また、当該技術の確立は、ヒトマイクロドーズ試験への応用に発展する可能性がある。

公開日・更新日

• 公開日: 2011-05-30
• 更新日: -