文献情報
文献番号
200619021A
報告書区分
総括
研究課題名
老化関連遺伝子klothoによるカルパイン活性制御機構の解明および関連疾患の予防と治療に関する研究
課題番号
H17-長寿-一般-008
研究年度
平成18(2006)年度
研究代表者(所属機関)
遠藤 玉夫((財)東京都高齢者研究・福祉振興財団 東京都老人総合研究所 老化ゲノム機能研究チーム)
研究分担者(所属機関)
研究区分
厚生労働科学研究費補助金 疾病・障害対策研究分野 長寿科学総合研究
研究開始年度
平成17(2005)年度
研究終了予定年度
平成18(2006)年度
研究費
10,240,000円
研究者交替、所属機関変更
-
研究報告書(概要版)
研究目的
klotho変異マウスは多彩な老化症状を呈することから、klotho遺伝子が老化の制御に深く関与することが考えられている。最近klotho蛋白質にβ-グルクロニダーゼ活性があることが報告され、klotho蛋白質が糖分解酵素として機能している可能性が示唆された。しかし、klotho蛋白質の糖分解酵素としての具体的な作用点や基質に関してはほとんど分かっていない。昨年度の当研究事業において、klotho変異マウスの腎臓と肺で異常糖鎖が発現することを明らかにしたことから、本年度は異常糖鎖の発現とklotho蛋白質の関連について検討した。また、老化関連疾患の予防や治療への応用を目指して、klotho蛋白質の発現制御に関わる物質のスクリーニング方法を検討した。
研究方法
(1) klotho変異マウスの腎臓と肺から異常糖鎖を含む膜画分蛋白質を調製し、組換え型klotho蛋白質を用いて、異常糖鎖とklotho蛋白質の相互作用を調べた。(2) 我々が見いだしたklotho蛋白質を発現しているヒト尿細管由来細胞を用いたスクリーニングの有効性を調べるため、個体レベルでklotho遺伝子の発現への影響が報告されているビタミンD3の影響を調べた。
結果と考察
(1) 肺および腎臓由来の膜画分蛋白質を組換え型klotho蛋白質と反応させた結果、異常糖鎖に対する抗体およびレクチンの反応性が減少した。一方、熱処理したklotho蛋白質では反応性に変化はみられなかった。この結果は、異常糖鎖がklotho蛋白質によって分解されることを示唆している。(2)尿細管細胞へのビタミンD3の添加によりklotho蛋白質の発現とカルシウム輸送量が増加した。この結果から、本細胞が尿細管の性質を保持していること、ビタミンD3は細胞に直接作用してklotho蛋白質の発現を増加させることが明らかとなった。
結論
klotho蛋白質が糖分解酵素として機能している可能性が示された。尿細管由来細胞を用いたklotho蛋白質の発現制御物質のスクリーニングが有効であることが示された。
公開日・更新日
公開日
2007-04-11
更新日
-