文献情報
文献番号
201324078A
報告書区分
総括
研究課題名
重症骨系統疾患の予後改善に向けての集学的研究
課題番号
H24-難治等(難)-一般-040
研究年度
平成25(2013)年度
研究代表者(所属機関)
大薗 惠一(国立大学法人大阪大学 大学院医学系研究科)
研究分担者(所属機関)
- 中村 友彦(長野県立こども病院)
- 橋本 淳(国立病院機構大阪南医療センター)
- 藤原 幾磨(東北大学大学院医学系研究科)
- 道上 敏美(地方独立行政法人大阪府立病院機構大阪府立母子保健総合医療センター研究所)
- 八十田 明宏(京都大学)
- 仲野 和彦(大阪大学大学院歯学研究科)
- 長谷川 高誠(岡山大学病院)
- 澤井 英明(兵庫医科大学)
研究区分
厚生労働科学研究費補助金 疾病・障害対策研究分野 難治性疾患等克服研究(難治性疾患克服研究)
研究開始年度
平成24(2012)年度
研究終了予定年度
平成25(2013)年度
研究費
38,500,000円
研究者交替、所属機関変更
-
研究報告書(概要版)
研究目的
重症骨系統疾患の予後改善を目的として、新生児科、小児科、整形外科、歯科、内科、産科などの立場から、臨床研究、遺伝子解析、細胞培養系やモデル動物などの多面的アプローチにより集学的に研究を行う。骨系統疾患は、骨/関節のみならず全身的な症状を呈するが、重症型では呼吸機能が不十分で人工呼吸管理を要する。呼吸管理法が進歩し、原病に対する治療、酵素補充療法など新規治療法が開発されてきたので、重症骨系統疾患をとりまく環境は大きく変化している。本研究では、まず、複数の重症骨系統疾患を対象とし、呼吸管理を行っているかどうかを含め、診療の実態について調査研究を行う。また、正確な診断のために、多数の遺伝子について変異解析を行う。骨系統疾患に伴う乳歯脱落、歯牙欠損などを対象に実態調査を行い、歯科的問題の実態を明らかにする。研究者および患者会のネットワークづくりのため、骨系統疾患解説のホームページ(HP)を作成し、最新の情報を提供するとともに、患者会のHPとリンクさせる。アンケート調査などを踏まえて、各疾患個別の診断と管理のガイドラインを作成し、HPに掲載する。HP上に診断の相談窓口を開設し、責任遺伝子について変異解析を行う。また、新たな治療法の開発のため、モデル動物を用いて、疾患特定的iPSを用いた病態解析、CNP(C型Na利尿ペプチド)治療効果の検討および、CNP/NPR-B系異常症の表現型の詳細な解析を行う。
研究方法
本研究の初年度に行ったアンケート調査において、骨系統疾患診療の実態が明らかとなったので、その成果を踏まえ、本年度は、重症骨系統疾患に関する二次調査を実施した。iPS細胞の段階でのALP活性について健常人由来のものと、低ホスファターゼ症患者由来のもの(HPP-H)とで比較を行う。ゼラチンで処理し、MEFを播種したplateにそれぞれのiPS細胞を播種し、7日間培養を行った。その後、ALP染色およびALP活性を測定した。本症のモデルマウスを使って、TNSALP遺伝子治療の効果を歯科的に観察した。対象骨系統疾患に対し、サンガー法により、遺伝子変異の有無を検討した。新たな自然発症CNP/NPR-B系活性低下モデルとしてのlbab/lbabについて、マウスの全長や軟X線写真による各骨長の測定、成長板の組織学的解析をおこなった。
結果と考察
低フォスファターゼ症30例程度が把握され、その病型が判明した。本症の疾患特異的iPSの作製および他施設から入手しALP活性の検討を行った。ALP染色では、健常人由来iPS細胞では染色が認められたのに対し、低フォスファターゼ症患者由来iPS細胞では染色が全く認められなかった。歯科的な問題のある例は23例であった。低フォスファターゼ症モデルマウスに対して遺伝子治療の歯科的効果を認めた。53例の低フォスファターゼ症について、遺伝子型を検討したところ、c.1559delT変異が106アレル中43アレル(41%)にのぼった。第1例目のNPR-Bの機能獲得型異常症家系(日本人家系)は英文原著の形で報告した。これに引き続き2つ目の機能獲得型変異を同定した。呼吸管理を要した重症骨系統疾患のうち、14例は生存退院できていた。19家系の骨形成不全症のうち、74%でI型コラーゲンの異常を認めた。TD児のうち、のべ20名が積極的な延命治療を受けている一方、78名は妊娠中絶もしくは看取りの医療が行われていた。10例の重症大理石骨病のうち、5例は生存していた。FGFR3関連疾患は55例把握された。lbab/lbabの吻臀長は野生型と比較して10週齢で短縮した。胎児骨系統疾患を妊娠中から適正に診断して、その後の妊娠管理や分娩形式の決定に役立てるという目標が相当部分実現してきたと思われる。
結論
低フォスファターゼ症の診療経験に関する二次調査を行い、小児科研修施設では、病型の把握を行なった。呼吸管理14例、生存23例、遺伝子診断17例、出生前診断6例、および、25施設が酵素補充療法の治験が始まっていることを知っていたという結果が得られた。低フォスファターゼ症由来iPS細胞においてもALP活性が低いことを確認した。NPR-Bの機能獲得型変異に伴う高身長を新たな疾患単位として確立した。骨形成不全症の遺伝子解析にて、74%に1型コラーゲン遺伝子の変異を認めた。タナトフォリック児のうち、のべ20名が積極的な延命治療を受けている一方、78名は妊娠中絶もしくは看取りの医療が行われていた。CLCN7変異に基づく遅発型大理石骨病II型においてもQOLに影響を及ぼす合併症を有する症例が存在することが明らかとなった。機能低下型の自然発症CNP遺伝子変異マウスおよび軟骨特異的CNPノックアウトマウスを用いてCNPの骨伸長に対する生理的作用を解析した。
公開日・更新日
公開日
2015-06-30
更新日
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