Claudinを標的とした創薬基盤技術の開発

文献情報

文献番号

201209008A

報告書区分

総括

研究課題名

Claudinを標的とした創薬基盤技術の開発

課題番号

H23-政策探索-一般-008

研究年度

平成24(2012)年度

研究代表者(所属機関)

近藤　昌夫(国立大学法人大阪大学　大学院薬学研究科)

研究分担者(所属機関)

八木　清仁(大阪大学　大学院薬学研究科)
國安　弘基(奈良県立医科大学)
深澤　征義(国立感染症研究所　細胞化学部)
國澤　純(医薬基盤研究所)
岡田　欣晃(大阪大学　大学院薬学研究科)

研究区分

厚生労働科学研究費補助金厚生科学基盤研究分野創薬基盤推進研究（政策創薬探索研究）

研究開始年度

平成23(2011)年度

研究終了予定年度

平成27(2015)年度

研究費

30,000,000円

研究者交替、所属機関変更

-

研究報告書（概要版）

研究目的

昨今の上皮細胞生物学の進展により、タイトジャンクションシール機能を担う分子として、4回膜貫通蛋白質claudin（CL）が同定され、非侵襲性投与法、上皮がんターゲティング法、粘膜ワクチン、C型肝炎ウイルス（HCV）感染阻害法、薬物の血液脳関門透過法開発の可能性が示唆されている。しかしながら、CLは抗原性が低い上に立体構造が解析されておらず、CL binderの創製は著しく立ち遅れており、CLを標的とした創薬研究は遅々として進展していない。現在までに申請者は、CL-4 binderを用いたバイオ医薬の経粘膜吸収促進技術、癌ターゲティング法、粘膜ワクチン技術を先駆けて確立し、CLを標的とした創薬基盤として出芽バキュロウイルス（BV）を利用したCL蛋白質発現系を用いたCL binderスクリーニング系を構築した。上述した背景を踏まえ本研究では、CLを標的とした創薬基盤技術の創出を目指す。

研究方法

CL binderのスクリーニングに資する各種CL提示BV、各種CL発現細胞を作製し、既存の広域CL binderを用いてCL結合性を解析した。さらに、CL提示BV、CL欠損マウス、自己免疫疾患マウスなどを用いて、CL scFvファージライブラリを作製し、CL結合性scFvの取得、および抗体の作製を試みた。

結果と考察

免疫法の最適化を行い、CL結合性scFv候補分子、および抗CL-1抗体4クローン、抗CL-4抗体11クローンを樹立し、結合特性などの解析を行った。さらに昨年度に引き続き、がん組織におけるCL発現、粘膜免疫組織における抗原取込み機構の解析、血管内皮バリア解析に向けた基礎的知見の集積を図った。また、抗体のC型肝炎ウイルス感染阻害活性、抗癌活性を解析し、薬理作用に優れたクローンを見出した。

結論

以上、現在までの検討により、CL 結合性scFvクローンを複数見出し、さらに抗CL-1抗体、抗CL-4抗体の創製に成功した。ライブラリの構築に成功した。今後は、引き続き、CL binderの創製を進めると同時に、抗体の各種活性を解析し、がん・ワクチン・感染症・DDSへの応用に向けた基礎的知見の集積を図る予定である。