癌に対する新たなコンドロイチン硫酸ポリマー修飾腫瘍溶解性麻疹ウイルス療法開発のための前臨床研究

文献情報

文献番号

201109005A

報告書区分

総括

研究課題名

癌に対する新たなコンドロイチン硫酸ポリマー修飾腫瘍溶解性麻疹ウイルス療法開発のための前臨床研究

課題番号

H23-政策探索・一般-005

研究年度

平成23(2011)年度

研究代表者(所属機関)

谷　憲三朗(九州大学　生体防御医学研究所)

研究分担者(所属機関)

濱田　雄行(愛媛大学　医学部附属病院)

研究区分

厚生労働科学研究費補助金厚生科学基盤研究分野創薬基盤推進研究（政策創薬探索研究）

研究開始年度

平成23(2011)年度

研究終了予定年度

平成27(2015)年度

研究費

53,000,000円

研究者交替、所属機関変更

-

研究報告書（概要版）

研究目的

腫瘍溶解性ウイルス療法において、ウイルス接種後に出現する中和抗体による抗腫瘍効果減弱が問題となっている。我々は近年インターフェロンα抵抗性麻疹ウイルスEdmonston株であるMV-NPL株の開発に成功した。さらにコンドロイチン硫酸ポリマー修飾法が、中和抗体によるアデノウイルス感染抑制を解除可能であることを明らかにした。本研究ではこれら２つの新規技術を組み合わせ、長期的抗腫瘍効果を期待できるコンドロイチン硫酸ポリマー修飾麻疹ウイルス療法（CSP-MV）を開発し、第Ⅰ相臨床研究実施に向けた準備を行う。

研究方法

種々の固形腫瘍細胞株に対するMV-NPLの殺細胞効果を検討した。同ウイルスのポリマー修飾はPEI（ポリエチレンイミン）及びCS(コンドロイチン硫酸)を順次付加し、ウイルス表面電荷の変移を確認した。同系マウスにOVHM卵巣癌細胞を皮下および腹腔内に移植し、抗腫瘍効果を検討した。MV-NPL精製は、Vero細胞にウイルス感染後翌日の培養上清ウイルスを回収し、限外濾過法にて濃縮した。抗麻疹ウイルス中和抗体として献血ベニロンを使用した。

結果と考察

MV-NPLはほぼ全細胞株に対して優れた殺細胞効果を示したが、腫瘍内投与が比較的容易である頭頸部癌を当面の治療対象に決定した。
MV-NPLの各ポリマー添加後のウイルス表面電荷の変移を確認できた(１元から７元)。同様にアデノウイルスを用いて３元から13元まで作製し、卵巣癌マウスモデルで、3回投与が治療効果誘導に必要であることを確認した。また、献血ベニロン中に麻疹ウイルス中和抗体が存在することを確認した。以上より、抗麻疹ウイルス中和抗体による感染抑制回避を検討できるin vitro確認系を確立できた。
MV-NPL精製は、上清中ウイルスを限外濾過法により17倍濃縮することに成功した。今後、さらに高純度のウイルスを得るため、アデノ随伴ウイルス精製に用いられているカラムクロマトグラフィー法等を用いて精製予定である。
また、MV-NPL感染可能なヒトCD46発現マウス肺癌細胞株を作製することで、抗麻疹中和抗体による感染抑制回避を検討できるマウス実験系を確立した。

結論

MV-NPLの多種癌細胞株への強力な殺細胞効果を明らかにした。さらにCSP-MVの作製とその最適化条件決定後に必要となる免疫回避実験系の確立に成功した。