文献情報
文献番号
201011026A
報告書区分
総括
研究課題名
RNA創薬を支援するバイオイメージング技術の確立
課題番号
H20-ナノ・若手-007
研究年度
平成22(2010)年度
研究代表者(所属機関)
浅井 知浩(静岡県立大学大学院 薬学研究科)
研究分担者(所属機関)
研究区分
厚生労働科学研究費補助金 厚生科学基盤研究分野 医療機器開発推進研究(低侵襲・非侵襲医療機器(ナノテクノロジー)研究)
研究開始年度
平成20(2008)年度
研究終了予定年度
平成22(2010)年度
研究費
5,000,000円
研究者交替、所属機関変更
-
研究報告書(概要版)
研究目的
本研究ではsiRNAの体内動態を非侵襲的、リアルタイムかつ高感度に解析する技術の確立を目的とし、siRNAの18Fポジトロン標識体の開発ならびにポジトロン断層法(PET)による動態解析技術の構築を目指した。
研究方法
事業計画2年目までに、siRNAポジトロン標識体の開発、siRNA体内動態のPET解析、近赤外蛍光インビボイメージングを用いたPET解析データの比較検証を計画通りに実施してきた。最終年度は、化学修飾siRNAおよび新規ベクターに搭載したsiRNAのPET動態解析、疾患モデル動物におけるsiRNAのPET動態解析等の応用研究に重点的に取り組んだ。
結果と考察
センス鎖3'末端にコレステロールを結合したsiRNAのアンチセンス鎖3'末端を18F標識し、化学修飾siRNAの体内動態のPET解析を試みた。コレステロール結合siRNAは、naked siRNAと比較して血中半減期が延長する様子が観察された。また、コレステロール結合siRNAは、naked siRNAと比較して肝臓に高い集積性を示した。このように化学修飾によるsiRNAの動態制御の有効性をPETイメージングすることに成功した。次に、我々がsiRNAベクターとして新たに開発した新規リポソームベクターに18F標識siRNAを搭載し、PET解析を試みた。コレステロール結合siRNAを搭載した新規ベクターでは全身からの強いシグナルが観察され、高い血中滞留性を示した。また複合体の一部が肝臓や脾臓などの細網内皮系組織に捕捉される様子が観察された。このsiRNAの挙動は、ベクターの体内動態試験結果とほぼ一致しており、in vivoにおいてsiRNAが新規ベクターにしっかりと保持され、体内動態制御がなされていることが示唆された。最後に、疾患モデル動物におけるsiRNA体内動態のPET解析を実施した。Colon26 NL-17大腸がん細胞をマウス右後肢皮下に移植し、担がんマウスを作成した。各種ベクターに18F 標識siRNAを搭載し、担がんマウスにおける体内動態をPET解析した。その結果、PEG修飾リポソームあるいはリガンド結合型リポソームに搭載したsiRNAにおいて高い腫瘍集積性が観察された。
結論
RNA創薬におけるsiRNA体内動態のPET解析技術の有用性が証明された。本技術によって医薬品候補のsiRNAの体内動態に関して有益な情報が得られることにより、RNA創薬の開発効率を高め、創薬の加速化に結び付くことが期待される。
公開日・更新日
公開日
2011-05-25
更新日
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