長期抗HIV療法に適う新規エイズ治療薬Reverse　Transcriptase　associated　RNase　H活性阻害剤の実用化開発

文献情報

文献番号

201009013A

報告書区分

総括

研究課題名

長期抗HIV療法に適う新規エイズ治療薬Reverse　Transcriptase　associated　RNase　H活性阻害剤の実用化開発

課題番号

H21-政策創薬・一般-010

研究年度

平成22(2010)年度

研究代表者(所属機関)

星野　忠次(国立大学法人　千葉大学　大学院薬学研究院)

研究分担者(所属機関)

駒野　淳(国立感染症研究所　エイズ研究センター)
岩谷　靖雅(国立病院機構　名古屋医療センター　臨床研究センター)
村上　努(国立感染症研究所　エイズ研究センター)
沖本　憲明(理化学研究所　基幹研究所)

研究区分

厚生労働科学研究費補助金厚生科学基盤研究分野創薬基盤推進研究（政策創薬総合研究）

研究開始年度

平成21(2009)年度

研究終了予定年度

平成23(2011)年度

研究費

25,014,000円

研究者交替、所属機関変更

-

研究報告書（概要版）

研究目的

既存薬と作用機序が異なる新規抗HIV薬の開発は、薬剤耐性ウイルスを抑制する有効かつ現実的な対策である。本研究班では、HIV逆転写酵素に内在するRNase H活性を標的とする抗HIV薬の開発を進めている。研究終了時には、前臨床レベルの薬物を創出することが目標である。

研究方法

本年度は、Ⅰ.計算機設計、Ⅱ.有機合成、Ⅲ.活性測定、Ⅳ.毒性評価、Ⅴ.変異パターンの分子疫学解析、を実施した。

結果と考察

Ⅰ.計算機設計では、これまでに見出された活性化合物の代表的なものについて、標的タンパク質である逆転写酵素のRNaseH部位との結合構造予測を行った。RNaseH領域に２つの金属イオンを配置し、さらにこの金属イオンに配位するように阻害剤を配置して、分子軌道法と分子動力学法を組合せた計算技法により、予測した結合構造が実現可能な原子配置であるかを確かめた。Ⅱ.有機合成では、先導化合物を足掛かりに、100種類を越える誘導体を合成展開した。前年度の合成物と合わせて、合計190種類の合成物を得ることができた。主にニトロフランカルボン酸を基本骨格として、これに様々な置換基を導入した化合物を合成した。Ⅲ.活性測定では、本年度は152種類の小分子化合物のRNaseH阻害活性を評価し、新たに38種類の誘導体をRNaseH阻害剤として同定することに成功した。昨年度よりも高いRNaseH阻害効果を有する化合物が同定された。Ⅳ.毒性評価では、本研究班で合成しRNase H 阻害活性を測定した28化合物について、MT-4細胞と293T細胞を使用してそれらに対する細胞毒性をMTT法にて測定した。その結果、どちらの細胞においても、CC50が10 M程度に比較的細胞毒性の強い化合物からCC50が100 M以上の細胞毒性の弱い化合物まで確認された。Ⅴ.変異パターンの分子疫学解析では、未治療患者に感染している HIV-1 の RNaseH 遺伝子多型を解析、その遺伝情報を蓄積した。さらに治療患者に見られる RNaseH 遺伝子変異と、RT Polymerase 遺伝子領域およびインテグラーゼ遺伝子領域の変異との相関性について解析した。

結論

研究成果として、当初IC50値で16.5μMの先導化合物を有していたが、前年度までに1.0μMの活性化合物を得た。今年度はさらに構造変換を進め、IC50値で0.8μMの誘導体を得ることに成功した。