細網異形成症の診断と治療に関する調査研究

文献情報

• 文献番号: 200936190A
• 報告書区分: 総括
• 研究課題名: 細網異形成症の診断と治療に関する調査研究
• 課題番号: H21-難治・一般-135
• 研究年度: 平成21(2009)年度
• 研究代表者(所属機関): 野々山 恵章(防衛医科大学校 小児科学講座)

研究分担者(所属機関)

• 今井　耕輔(防衛医科大学校病院　医療情報部)
• 中畑　龍俊(京都大学 iPS細胞研究センター)
• 森尾　友宏(東京医科歯科大学大学院 発達病態 小児科学分野)
• 小原　收(財団法人かずさDNA研究所　生物物理学)
• 蒲池　吉朗(名古屋大学医学部附属病院)
• 山口　博樹(日本医科大学 病態制御腫瘍内科学)
• 塩谷　彰浩(防衛医科大学校 耳鼻咽喉科学)

• 研究区分: 厚生労働科学研究費補助金 疾病・障害対策研究分野 難治性疾患克服研究
• 研究開始年度: 平成21(2009)年度
• 研究終了予定年度: 平成21(2009)年度
• 研究費: 20,000,000円
• 研究者交替、所属機関変更: -

研究報告書（概要版）

研究目的

　細網異形成症は免疫系細胞、血液系細胞、内耳細胞への多系統の障害をきたす難病である。
細網異形成症の診断基準、診断法、新生児期スクリーニング法の確立、原因遺伝子AK2の機能解析、患者細胞を用いた病態解明、、難聴の解析、至適造血幹細胞移植法の確立、iPS細胞を用いた遺伝子治療などの新規治療法の開発を行い、早期発見、早期治療により本疾患を根治し、もって患者に益することを目的とした。

研究方法

　申請者が構築したインターネットを活した先天性免疫不全症の中央診断・登録・遺伝子解析システムPIDJを細網異形成症に応用して疫学調査、軽症例、非典型例を含めた実態把握を行った。
　さらに、申請者が確立した、原因遺伝子AK2のタンパク発現解析、遺伝子解析法により、確定診断を行った。
　細網異形成症患者由来fibroblastsを樹立した。これを使いiPS細胞作製を行っている。患者骨髄細胞を用いコロニーアッセイにより骨髄細胞の分化解析を行った。内耳細胞におけるAK2蛋白発現解析法を検討した。
Ｔ細胞新生能のマーカーであるTRECsの測定を行った。
　血液細胞分化障害、難聴の解析を目的として、AK2ノックアウトマウスの作製を開始した。
　造血幹細胞移植による治療成績の国内調査を行った。

結果と考察

　タンパク発現、遺伝子発現、遺伝子変異解析による確定診断法を確立した。これにより診断指針案を作製した。
　また、PIDJ登録システムを用いて、新規患者を見いだし、遺伝子解析などにより診断を確定した。
　患者造血幹細胞のコロニーアッセイによる、分化障害を検討することが出来た。
　患者ではTRECsが低下していることを示した。
　内耳細胞におけるAK2蛋白発現解析法を確立した。
　患者由来iPS細胞の作製準備が整った。
　骨髄移植により根治できた患者を見いだすことが出来た。
　患者予後調査をもとに治療指針案を作製した。
　

結論

　細網異形成症の診断法を確立した。病態解析を行い、新規診断治療法の開発に成果を上げた。
　TRECs測定により新生児期スクリーニングが可能であることを示した。
　インターネットを活用した診断登録システムであるPIDJの有用性を示すことが出来た。

公開日・更新日

• 公開日: 2010-05-31
• 更新日: -

行政効果報告

• 文献番号: 200936190C

成果

• 専門的・学術的観点からの成果: 細網異形成症の原因遺伝子であるAK2の遺伝子解析法、AK2のウェスタンブロットによるタンパク解析法を確立した。; 病態解析として患者骨髄細胞を用いてコロニーアッセイを行った。; 患者よりfibroblastsを樹立した。これを用いてiPS細胞の作製を開始した。
• 臨床的観点からの成果: 細網異形成症の新規患者を見出し、遺伝子解析などより確定診断した。; インターネットを用いた中央診断登録システムであるPIDJを用い、国内患者の症状、検査所見、予後を解析した。
• ガイドライン等の開発: 細網異形成症の診断基準・治療指針を作製した。診断基準としては、AK2蛋白発現低下をWestern blotで解析し、AK2遺伝子異常をDNAシークエンスで解析することとした。治療指針としては、前処置法を含めた造血幹細胞移植の方法（案）を提示した。; さらに新生児マススクリーニング法の開発も行った。
• その他行政的観点からの成果: インターネットを活用し、希少難病を全国的に診断、登録する方法を確立し、その有効性を示した。; 一般医が専門医にインターネットを介してコンサルトする方法を確立した。; 患者会での本症の啓発を行った。
• その他のインパクト: 以下の内容がマスコミで報道された。; 1) 細網異形成症を含む免疫不全症患者に対する γ－グロブリン補充療法の用量制限緩和の承認。; 2) 細網異形成症を含む免疫不全症患者に対するγ－グロブリン持続皮下注製剤早期導入の必要性。; 3) 細網異形成症を含む新生児スクリーニングの必要性。; 4) 細網異形成症を含む免疫不全症中央診断登録システムであるPIDJの有効性。

発表件数

• 原著論文（和文）: 2件
• 原著論文（英文等）: 5件
• その他論文(和文): 1件
• その他論文(英文等): 0件
• 学会発表(国内学会): 29件
• 学会発表(国際学会等): 1件
• その他成果(特許の出願): 0件 ; 「出願」「取得」計0件
• その他成果(特許の取得): 0件
• その他成果(施策への反映): 0件
• その他成果(普及・啓発活動): 0件

主な原著論文20編（論文に厚生労働科学研究費の補助を受けたことが明記された論文に限る）

• 原著論文1: Uchisaka N, Takahashi N, Sato M, et al.; Two brothers with ataxia-telangiectasia-like disorder with lung adenocarcinoma.; J. Pediatrics , 155 , 435-438 (2009)
• 原著論文2: Notarangelo L.D, Fischer A, Geha R.S, Casanova J-L, et al.; Primary immunodeficiencies: 2009 update, The International Union of Immunological Societies (IUIS) Primary Immunodeficiencies (PID) Expert Committee.; J. Allergy Clin. Immunol. , 124 , 1161-1178 (2009)
• 原著論文3: Matsuda K, Sakashita K, Taira C, et al.; Quantitative assessment of PTPN11 or RAS mutations at the neonatal period and during the clinical course in patients with juvenile myelomonocytic leukaemia.; Br J Haematol. (2009)
• 原著論文4: Okuya M, Kurosawa H, Kubota T, et al.; Hematopoietic stem cell transplantation for X-linked thrombocytopenia from mild symptomatic carrier.; Bone Marrow Transplant. (2009)
• 原著論文5: Hashii Y, Yoshida H, Kuroda S, et al.; Hemophagocytosis after bone marrow transplantation for JAK3-deficient severe combined immunodeficiency.; Pediatr Transplant. (2009)
• 原著論文6: Morinishi Y, Imai K, Nakagawa N, et al.; Identification of Severe Combined Immunodeficiency by T-Cell Receptor Excision Circles Quantification Using Neonatal Guthrie Cards.; J. Pediatr. , 155 (6) , 829-833 (2009)
• 原著論文7: Tsuboi S, Takada H, Hara T, et al.; FBP17 mediates a common molecular step in the formation of podosomes and phagocytic cups in macrophages.; J Biol Chem. (2009)
• 原著論文8: Keerthikumar S, Raju R, Kandasamy K, et al.; RAPID: Resource of Asian Primary Immunodeficiency Diseases.; Nucleic Acids Res. , 37 , 863-867 (2009)
• 原著論文9: Albert MH, Bittner TC, Nonoyama S, et al.; X-linked thrombocytopenia (XLT) due to WAS mutations:Clinical characteristics, long-term outcome and treatment options.; Blood (2009)
• 原著論文10: Okafuji I, Nishikomori R, Kanazawa N,; Role of the NOD2 genotype in the clinical phenotype of Blau syndrome and early-onset sarcoidosis.; Arthritis Rheum. , 60 , 242-250 (2009)
• 原著論文11: Chang H, Yoshimoto M, Umeda K, et al.; Generation of transplantable, functional satellite-like cells from mouse embryonic stem cells.; FASEB J. , 23 , 1907-1919 (2009)
• 原著論文12: Higashi A.Y., Ikawa T, Muramatsu M, et al.; Direct hematological toxicity and illegitimate chromosomal recombination caused by the systemic activation of CreERT2.; J Immunol. , 182 , 5633-5640 (2009)
• 原著論文13: Niwa A, Umeda K, Chang H, et al.; Orderly Hematopoietic Development of Induced Pluripotent Stem Cells via Flk-1+ Hemoangiogenic Progenitors.; J. Cell. Physiol. , 221 , 367-377 (2009)
• 原著論文14: Miyara M, Yoshioka Y, Kitoh A, et al.; Functional delineation and differentiation dynamics of human CD4+ T cells expressing the FoxP3 transcription factor.; Immunity , 30 , 899-911 (2009)
• 原著論文15: Honda M, Takagi M, Chessa L, Morio T, Mizuatni S.; Rapid diagnosis of ataxia-telangiectasia by flow cytometric monitoring of DNA damage-dependent ATM phosphorylation.; Leukemia. , 23 , 409-414 (2009)
• 原著論文16: Keerthikumar S, Bhadra S, Kandasamy K, et al.; Prediction of Candidate Primary Immunodeficiency Disease Genes Using a Support Vector Machine Learning Approach.; DNA Res. , 16 (6) , 345-351 (2009)
• 原著論文17: Ohara O.; From transcriptome analysis to immunogenomics: current status and future direction.; FEBS Lett. , 583 , 1662-1667 (2009)
• 原著論文18: Takaoka T, Shiotani A, Saito K, et al.; Neuronal re-juvenilization in the nucleus ambiguus after vagal nerve injury.; Neurosci Res. (2009)
• 原著論文19: Ikeda K, Yamaguchi K, Tanaka T, et al.; Unique activation status of peripheral blood mononuclear cells at acute phase of Kawasaki disease.; Clin Exp Immunol. (2009)
• 原著論文20: Maekawa H, Matsunobu T, Tsuda H, et al.; Therapeutic effect of edaravone on inner ear barotrauma in the guinea pig.; Neurochem Int. , 54 , 513-518 (2009)

公開日・更新日

• 公開日: 2015-06-08
• 更新日: -