文献情報
文献番号
200936122A
報告書区分
総括
研究課題名
進行性骨化性線維異形成症(FOP)の生体試料の集積と新規治療法の開発に関する基盤研究
課題番号
H21-難治・一般-067
研究年度
平成21(2009)年度
研究代表者(所属機関)
古谷 博和(独立行政法人 国立病院機構大牟田病院 神経・筋センター)
研究分担者(所属機関)
- 片桐 岳信(埼玉医科大学ゲノム医学研究センター 病態生理部門)
- 北條 浩彦(国立精神・神経センター神経研究所遺伝子工学研究部)
研究区分
厚生労働科学研究費補助金 疾病・障害対策研究分野 難治性疾患克服研究
研究開始年度
平成21(2009)年度
研究終了予定年度
平成21(2009)年度
研究費
5,000,000円
研究者交替、所属機関変更
-
研究報告書(概要版)
研究目的
進行性骨化性線維異形成症(fibrodysplasia ossificans progressiva: FOP)は、これまで整形外科、リハビリ科で症例の診断や経過観察が行われている事が多かった。FOPの殆ど全ての症例がALK2(ACVR1)遺伝子のR206Hの変異で発症するが、我々はこれまでに世界初のG356D変異を有する患者さんを発見するとともに、ALK2の遺伝子産物が構成的に骨形成シグナルを伝達する可能性を明らかにし、筋組織の急激な破壊・再生が異所性の骨化を誘発する可能性を提唱してきた。従って変異を有するALK2遺伝子の発現抑制やそのシグナルを阻害する薬剤がFOPの有効な治療薬になり得る可能性が考えられる。今回の研究はこれらの点を確認することを目的とした。
研究方法
1.FOPの生体試料の収集の目的で、特にこれまで見過ごされていた可能性の高い日本全国の神経内科領域の医療機関にFOPの実態調査を行った。
2.新たなFOP治療法の開発研究として、まず非典型的FOPとして報告されているALK2のG356D変異を安定的に発現する筋芽細胞の樹立を試みた。
3.RNAi法を利用した治療法の開発として、FOP発症と関連するALK2遺伝子内の変異塩基部位(R206H)をターゲットとする対立遺伝子特異的RNAi誘導を検討した。
2.新たなFOP治療法の開発研究として、まず非典型的FOPとして報告されているALK2のG356D変異を安定的に発現する筋芽細胞の樹立を試みた。
3.RNAi法を利用した治療法の開発として、FOP発症と関連するALK2遺伝子内の変異塩基部位(R206H)をターゲットとする対立遺伝子特異的RNAi誘導を検討した。
結果と考察
1.実態調査の結果、新たに5例のFOP疑い症例と2例の確定症例を見いだした。これはFOPの罹患率から考えると極めて多く、FOP症例が神経内科関連医療機関で診療されている事が明らかとなった。
2.ALK2タンパク質を定常的に発現する株が得られ、細胞内シグナルの発現に典型的FOPとの間で差異が認められた。さらにその原因を解明するために、ALK2-EGFP融合タンパクを一過性に発現させ、FACSで分画する実験系を構築した。
3.変異型ALK2遺伝子に対して特異的なRNAiノックダウンを誘導するsiRNA二量体を設計し選定した。この対立遺伝子特異的RNAi誘導法を治療に応用することで、正常型ALK2遺伝子の発現に影響せずに、異常型ALK2遺伝子だけを特異的に発現抑制する新しい治療の可能性が開けた。
2.ALK2タンパク質を定常的に発現する株が得られ、細胞内シグナルの発現に典型的FOPとの間で差異が認められた。さらにその原因を解明するために、ALK2-EGFP融合タンパクを一過性に発現させ、FACSで分画する実験系を構築した。
3.変異型ALK2遺伝子に対して特異的なRNAiノックダウンを誘導するsiRNA二量体を設計し選定した。この対立遺伝子特異的RNAi誘導法を治療に応用することで、正常型ALK2遺伝子の発現に影響せずに、異常型ALK2遺伝子だけを特異的に発現抑制する新しい治療の可能性が開けた。
結論
1.今後神経内科、一般内科領域でもFOP症例に注意する必要がある。
2.G356D変異を安定的に発現する筋芽細胞系は今後のFOPの病態及び治療研究に用いるために有用である。
3.対立遺伝子特異的RNAi誘導法は今後FOPの具体的な治療法の開発の上で有用なツールになる。
2.G356D変異を安定的に発現する筋芽細胞系は今後のFOPの病態及び治療研究に用いるために有用である。
3.対立遺伝子特異的RNAi誘導法は今後FOPの具体的な治療法の開発の上で有用なツールになる。
公開日・更新日
公開日
2010-06-09
更新日
-