放射線感受性ナノバイオ・ウイルス製剤の開発と難治性固形癌に対する臨床応用の検討

文献情報

文献番号

200823042A

報告書区分

総括

研究課題名

放射線感受性ナノバイオ・ウイルス製剤の開発と難治性固形癌に対する臨床応用の検討

課題番号

H19-3次がん・一般-028

研究年度

平成20(2008)年度

研究代表者(所属機関)

藤原　俊義(岡山大学医学部・歯学部附属病院　遺伝子・細胞治療センター)

研究分担者(所属機関)

研究区分

厚生労働科学研究費補助金疾病・障害対策研究分野第３次対がん総合戦略研究

研究開始年度

平成19(2007)年度

研究終了予定年度

平成21(2009)年度

研究費

26,400,000円

研究者交替、所属機関変更

研究報告書（概要版）

研究目的

難治固形癌に対する新たな抗癌剤開発は、分子標的薬剤の開発などにより積極的に進められており、その治療成績の向上も現実のものとなってきている。しかし、副作用や耐性の出現など解決すべき問題点は多く、新たな治療戦略の開発は必須と考えられる。本研究の目的は、ベクターとして多くの遺伝子治療で使用され、その安全性が確認されてきたアデノウイルスのゲノムを改変し、より強力な抗腫瘍活性を有する武装化（armed）ナノバイオ・ウイルス製剤を開発することである。

研究方法

「かぜ」症状の原因となるアデノウイルス5型を基本骨格とし、80-90%のヒト悪性腫瘍で高い活性がみられる不死化関連酵素テロメラーゼの構成分子であるhTERT遺伝子のプロモーターでウイルス増殖に必須のE1遺伝子を制御することで、癌細胞のみで増殖する腫瘍融解アデノウイルスOBP-301を構築した。さらに、強力なアポトーシス誘導機能を持つ癌抑制遺伝子p53をウイルスのE3遺伝子領域に搭載して、ナノバイオ・ウイルス製剤OBP-702を作成した。OBP-702とOBP-301、さらにp53遺伝子を発現する非増殖型アデノウイルスAdvexinとの抗腫瘍活性の比較検討を行い、p53標的遺伝子発現を検証することで分子機構の解析を行った。また、OBP-702のOBP-301より強力な放射線増感作用をin vitroにおいて検証した。

結果と考察

OBP-702はAdvexinの約10倍のアポトーシス誘導効果を有することが明らかとなった。これは、Advexinではp21が持続的に誘導されるため細胞周期停止が優位となるが、OBP-702感染では一過性のp21発現の後に減弱するためアポトーシスが強く誘導されると推測される。また、ヌードマウスの背部に移植したH358ヒト肺癌腫瘍にOBP-702を腫瘍内投与したところ、同容量のAdvexinに比べて有意に強力なin vivo抗腫瘍効果が認められた。OBP-301に感受性のあるH358ヒト肺癌細胞では同等の、またOBP-301に抵抗性のT.Tnヒト食道癌細胞では明らかに強力な放射線増感作用が観察された。フローサイトメトリーによるcaspase 3活性の測定では、いずれの細胞株でも放射線併用により2~5倍のアポトーシス誘導が認められており、OBP-702は放射線増感作用を有する生物製剤と言える。

結論

ナノバイオ・ウイルス製剤OBP-702は、強力なアポトーシス誘導を介した抗腫瘍効果を発揮し、さらに放射線感受性を増強することが明らかになった。