文献情報
文献番号
200817006A
報告書区分
総括
研究課題名
アンチセンス・モルフォリノによるＤｕｃｈｅｎｎｅ型筋ジストロフィーのエクソン・スキップ治療に向けた臨床応用研究
課題番号
H19-トランス・一般-003
研究年度
平成20(2008)年度
研究代表者(所属機関)
武田 伸一(国立精神・神経センター 神経研究所 遺伝子疾患治療研究部)
研究分担者(所属機関)
- 中村 昭則(国立精神・神経センター 神経研究所 遺伝子疾患治療研究部 )
- 岡田 尚巳(国立精神・神経センター 神経研究所 遺伝子疾患治療研究部 )
- 横田 俊文(国立精神・神経センター 神経研究所 遺伝子疾患治療研究部 )
- 村田 美穂(国立精神・神経センター )
- 三好 出(国立精神・神経センター 神経研究所 治験管理室)
研究区分
厚生労働科学研究費補助金 厚生科学基盤研究分野 医療技術実用化総合研究（基礎研究成果の臨床応用推進研究）
研究開始年度
平成19(2007)年度
研究終了予定年度
平成21(2009)年度
研究費
80,000,000円
研究者交替、所属機関変更
-
研究報告書（概要版）
研究目的
我々は米国･国立小児医療センターとの共同研究により、Duchenne型筋ジストロフィー(DMD)のモデル動物である筋ジストロフィー犬に対して、アンチセンス・モルフォリノを全身的に複数回投与してジストロフィン遺伝子のエクソン６及び８を強制的にスキップすることにより、全身の骨格筋でジストロフィンの発現が回復し、筋ジストロフィー症状が改善することを見出した。複数のエクソンを同時にスキップすることが可能になったことから、エクソン･スキップ治療の対象となるDMD患者の範囲が拡大し、遺伝子欠失例の８０％をカバーできることになった。
研究方法
ジストロフィン遺伝子のエクソン６及び８スキップの対象となるエクソン７単独欠失のDMD患者を国内で１名見出した。そこで、生検標本から立ち上げた培養細胞を用いてエクソン６と８のin vitro exon skippingを行う。一方、DMDの遺伝子異常のホットスポット領域に含まれる症例の多くをin frame化することが可能な、エクソン５１スキップを目標として、ジストロフィン遺伝子のエクソン５２を欠失したmdx５２マウスを用いて研究を進める。
結果と考察
筋ジス犬の遺伝子変異に相当するエクソン７単独欠失DMD患者からinformed consentを得て、倫理委員会の承認の下、入院して頂き、皮膚生検を行った。樹立した線維芽細胞及びリンパ芽球を用いてエクソン６及び８スキップが可能であることを実証した。一方、モルフォリノのin vivo導入によりmdx５２マウスの全身骨格筋におけるエクソン５１スキップの結果、筋ジストロフィー所見が改善することを見出した。エクソン４５－５０欠失DMD患者由来の細胞でエクソン５１スキップが可能であることも実証できたので、臨床治験を開始するために、米国と共同でモルフォリノの毒性試験を開始した。更にmdx５２マウスを用いてモルフォリノの投与によりエクソン４５?５５スキップが可能であることを示した。
結論
ジストロフィン遺伝子のエクソン６と８スキップに関しては、エクソン７単独欠失患者由来の細胞を用いてin vitroでのスキップを実現できたことから、臨床研究として局所投与を行う検討に入った。エクソン５１スキップに関しては、mdx５２マウスにおけるproof of conceptを提出することができたので臨床治験に向けて毒性試験とプロトコルの作成を急ぐ。
公開日・更新日
公開日
2011-05-30
更新日
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