文献情報
文献番号
200807028A
報告書区分
総括
研究課題名
機能性ｓｉＲＮＡ経口投与による家族性高コレステロール血症に対する新しい治療薬の開発
課題番号
H20-ゲノム・一般-008
研究年度
平成20(2008)年度
研究代表者(所属機関)
斯波 真理子(国立循環器病センター研究所 バイオサイエンス部)
研究分担者(所属機関)
- 山岡 哲二(国立循環器病センター研究所 生体工学部)
- 飯田 秀博(国立循環器病センター研究所 放射線医学部)
- 笹栗 俊之(九州大学大学院 医学研究院)
研究区分
厚生労働科学研究費補助金 厚生科学基盤研究分野 創薬基盤推進研究（ヒトゲノムテーラーメード研究）
研究開始年度
平成20(2008)年度
研究終了予定年度
平成22(2010)年度
研究費
40,133,000円
研究者交替、所属機関変更
-
研究報告書（概要版）
研究目的
FHは、LDL受容体遺伝子を欠損する遺伝病であり、ホモ接合体では著明な高コレステロール血症、幼少期より進行する動脈硬化症を示し、未治療では20才まで生きられない。現在、LDLアフェレーシス療法が行なわれているが、患者の身体的、経済的負担が大きく、改善が望まれている。遺伝子治療が試みられているが、充分な効果を得られていない。本研究では、安全性が高くて効率が良く、経口という非侵襲的な方法でのsiRNA遺伝子導入システムを開発して、FHをモデル疾患として治療実験を行い、体内動態を含めて総合的に研究し、研究終了後の臨床試験に備えることを目的とする。
研究方法
本研究では、ApoBsiRNAを修飾化することによって、経口投与による腸管での吸収、血液中での安定、肝臓への標的化を可能にし、肝臓でのリポ蛋白合成および分泌を抑制して、FHモデル動物の高コレステロール血症を改善する。siRNAをin vivoで安定化するために、キャリアーとしてPEIを用いること、siRNAの一部の塩基をBNA化すること、siRNAをコレステロール付加し、肝臓への標的化するために、プルラン化する。
結果と考察
ApoB siRNAを合成してin vitro及びin vivoスクリーニングを行って、肝臓でのApoB遺伝子発現抑制作用、VLDL+LDL-コレステロール低下作用を持つ最適siRNAの選択を行い、最終的に2種類のsiRNAを得た。当初、siRNAを直接プルラン化する予定であったが、技術的に困難な部分があるので、先ずポリエチレンイミン（PEI）を合成し、プルランと結合させて、siRNA用水溶性キャリアーを合成し、細胞内導入を行って、最適条件の設定に成功した。更に、プルラン－siRNAコンジュゲートを用い、siRNAの発現について検討を行った。修飾化siRNAの体内動態解析の予備実験としては、ラットを用いた123I-NMUのSPECTによるイメージングにも成功し、次年度のsiRNA体内動態解析の研究に備えている。siRNAの一部の塩基をBNA化したsiBNAおよびコレステロール修飾siBNAの合成にも成功しており、来年度に行う修飾化siRNAの静脈内投与による治療実験の準備が整った。
結論
修飾化siRNAの合成、in vitroおよびin vivoの条件検討を行ない、来年度の行なう修飾化siRNAの静脈内投与による治療実験の準備がすべて整った。
公開日・更新日
公開日
2011-05-27
更新日
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