超高速・簡便な遺伝子組換え食品の新規確定検査法の開発

文献情報

• 文献番号: 200734049A
• 報告書区分: 総括
• 研究課題名: 超高速・簡便な遺伝子組換え食品の新規確定検査法の開発
• 課題番号: H19-食品-若手-001
• 研究年度: 平成19(2007)年度
• 研究代表者(所属機関): 張替 直輝(武庫川女子大学薬学部ゲノム機能解析学教室)

研究分担者(所属機関)

• 田中　温子(武庫川女子大学薬学部ゲノム機能解析学教室)
• 齋藤　晋(住友ベークライト㈱S-バイオ開発部)
• 阿部　碧(住友ベークライト㈱S-バイオ開発部)

• 研究区分: 厚生労働科学研究費補助金 健康安全確保総合研究 食品の安心・安全確保推進研究
• 研究開始年度: 平成19(2007)年度
• 研究終了予定年度: 平成20(2008)年度
• 研究費: 4,000,000円
• 研究者交替、所属機関変更: -

研究報告書（概要版）

研究目的

本研究の目的は、穀物だけでなく食品などからも遺伝子組換え食品(GMO)を短時間で簡便に検出できる新規測定法を開発することによって、GMOを使用した食品の正確な情報提供と多くの研究及び検査機関のGMO検査への参加を促進することである。本研究では、(1) GMO混入量の重量%算出、(2) 複数遺伝子の同時検出、(3) 加工処理の影響の軽微化、(4) 分析工程の簡略化の4項目に着目し、それらの解決法として内部標準法とワンポットPCR法の開発を行った。

研究方法

内部標準法では、標準プラスミドを添加した食品サンプルから、DNeasy Plant Miniキットの使用法を一部改変してDNA抽出を行った。そのDNAサンプルを直接定量PCRで分析し、算出したGMO遺伝子のコピー数を標準プラスミドのコピー数で補正することでGMO含有量を算出した。
ワンポットPCR法では、食品サンプル溶解液を対象遺伝子補足用オリゴが固定されたPCRチューブに添加してハイブリダイゼーションにて対象遺伝子を抽出した。更に、そのPCRチューブにPCR試薬を添加して定量PCRを行った。今回、大豆のレクチン遺伝子にて、固定オリゴの配列及び濃度、ハイブリダイゼーションの時間及び温度、共雑物質の影響、加工処理の影響などの基礎検討を行った。

結果と考察

内部標準法によって、従来の公定法ではできなかった食品中のGMOの重量%算出及びDNA抽出工程の簡略化をすることができた。更に、Duplex定量PCRを組み合わせることで、一回の定量PCRでGMO遺伝子と標準プラスミドのコピー数を算出することができた。
ワンポットPCR法では、レクチン遺伝子の基礎検討を元に作成した条件を使用して、GM大豆溶解液からGMO遺伝子を濃度依存的に検出することができた。

結論

この二つの方法は、迅速で簡便だけでなく、穀物や食品からのGMOの重量%算出に対しても有用な方法であると考えられる。

公開日・更新日

• 公開日: 2008-06-04
• 更新日: -