間葉系幹細胞を用いた移植治療における品質及び安全性判定基準の確立

文献情報

• 文献番号: 200706024A
• 報告書区分: 総括
• 研究課題名: 間葉系幹細胞を用いた移植治療における品質及び安全性判定基準の確立
• 課題番号: H18-再生-若手-004
• 研究年度: 平成19(2007)年度
• 研究代表者(所属機関): 青山 朋樹(京都大学再生医科学研究所)

研究分担者(所属機関)

• 中村孝志(京都大学医学部整形外科)
• 戸口田淳也(京都大学再生医科学研究所)

• 研究区分: 厚生労働科学研究費補助金 厚生科学基盤研究分野 再生医療等研究
• 研究開始年度: 平成18(2006)年度
• 研究終了予定年度: 平成20(2008)年度
• 研究費: 8,000,000円
• 研究者交替、所属機関変更: -

研究報告書（概要版）

研究目的

本研究の目的は間葉系幹細胞(Mesenchymal stem cell, MSC)を用いた細胞医療を行う際の培養（行程あるいは課程）における品質評価及び安全性監視機構を構築することである。

研究方法

本研究は平成19年度に京都大学医学部付属病院整形外科で開始された臨床試験「難治性骨壊死に対するMSC細胞移植治療」と連携して実施する。この臨床試験は厚生労働省「ヒト幹細胞を用いる臨床研究に関する指針」の承認を得た試験であり、指針に遵守した評価方法の確立も課題としている。
　品質評価項目として1)MSCの多分化能の確認と2)増殖能の確認を行い、安全性監視項目として3)感染の監視4)癌化の監視を行う。本研究においてはこれらの4項目を定量的手法にて評価し、基準値を作成しそれに沿ったプロトコールを作成する。このプロトコールを用いて臨床試験を実施することで、In Vitroで得られた解析結果を臨床現場にフィードバックする

結果と考察

1) 分化能の確認（品質管理項目1）
　In Vitroで骨、軟骨、脂肪へ分化誘導を行い、特異的基質産生を定量評価するシステムを構築したが、検査結果が得られるまでに3週以上を要することから後追いの検査結果となるという欠点が指摘された。そこで骨、脂肪分化誘導との相関が認められる、細胞表面抗原マーカーCD106の発現、軟骨分化誘導時の上昇マーカーTGFb3の発現を新たに解析対象として有効性を確認している。
2) 増殖能の確認（品質評価項目2）
　In VitroにおけるMSCの増殖には細胞周期調節因子p16が関与していることが明らかになった(Shibata KR,2007)。このことからp16の発現値を定量解析し、培養継続可能回数の予測式を用いることで、増殖能予測の有効性を確認している。
3) 感染監視 (安全性監視項目1)
　京都大学輸血細胞治療部と共同でGMPグレードに準拠したプロトコール、SOP、定期検査方法を確立し、既に行われた臨床試験2例について有効であることが実証された。
4) 癌化監視(安全性監視項目2)
　早期悪性転化予測マーカーとしてp16遺伝子転写調節領域のメチル化解析の有効性を明らかにした(Shibata KR,2007)。この方法と染色体解析、免疫不全マウスへの皮下接種を行い、それらの有効性を比較検討している。

結論

平成18、19年度に作成した品質評価、安全性監視のためのプロトコールを用いて臨床試験「難治性骨壊死に対するMSC細胞移植治療」を開始した。今後プロトコールの問題点の検討、妥当性を検証していく予定である。

公開日・更新日

• 公開日: 2008-04-11
• 更新日: -