文献情報
文献番号
200614081A
報告書区分
総括
研究課題名
LEE遺伝子群非保有型腸管出血性大腸菌の疫学マーカーおよび新規治療薬の標的となる病原性遺伝子に関する基礎的研究
課題番号
H16-創薬-098
研究年度
平成18(2006)年度
研究代表者(所属機関)
伊豫田 淳(国立感染症研究所)
研究分担者(所属機関)
研究区分
厚生労働科学研究費補助金 厚生科学基盤研究分野 政策創薬総合研究
研究開始年度
平成16(2004)年度
研究終了予定年度
平成18(2006)年度
研究費
4,000,000円
研究者交替、所属機関変更
-
研究報告書(概要版)
研究目的
日本国内における腸管出血性大腸菌 (EHEC) による感染症は依然として年間二千例を超える数が報告されており、公衆衛生上の大きな問題点となっている。これまでの我々の研究から、三大血清群O157, O26, O111以外のEHECの約4割は、多くのEHECが保有するLEE (locus of enterocyte effacement) と呼ばれる病原性遺伝子群を保有しない、非保有型のEHEC (LEE-negative EHEC: LN-EHEC) であることが判明している。LN-EHECの保有する病原性因子については未だ不明な点が多く、その分布状況も不明である。本研究では、LN-EHECにおける病原性遺伝子の保有状況、血清型について解析を進めると共に、それらが保有する新規病原性因子、特に初期接着に関わる因子を同定し、これらがLN-EHECにおける疫学マーカーや新規抗菌剤あるいはワクチンの標的となり得る可能性について基礎的な解析を行うことを目的とする。
研究方法
血清型別よって三大血清群以外のEHECを抽出し、既知の病原性遺伝子の分布および培養細胞への接着能を解析する。新規病原性因子、特に接着因子について遺伝学的手法を用いて明らかにすると共に、新規接着遺伝子の分布・系統解析を行う。
結果と考察
新規接着因子EibGの分布解析から、EibGはLN-EHECに特異的に見出される接着因子であることが判明した。EibGを保有するLN-EHEC株の多くは血清群O91に属し、大腸菌の系統AまたはB1に属することが判明した。EibGに対する3種類のペプチド抗体を用いて接着防御実験を行ったが、細胞接着は阻害されなかった。EibGの特徴であるIgG結合活性はEibGを保有しない多くのLN-EHEC株にも見出された。既知のeib遺伝子に共通な配列を元にPCRプライマーデザインし、新規のIgG結合蛋白質をコードする遺伝子をクローニングした。その結果、少なくとも6つの新規Eib蛋白質をコードする遺伝子がLN-EHEC株に存在することが明らかとなった。
結論
LN-EHECの多くの株はIgG結合活性を持つ蛋白質をコードしており、Eib蛋白質はこれまでに同定されたEibA,C,D,E,F,G以外にも少なくとも6つ存在することが明らかとなった。Eib蛋白質はLN-EHEC株に特異的に存在する接着因子の一つである。
公開日・更新日
公開日
2007-04-03
更新日
-