文献情報
文献番号
200614050A
報告書区分
総括
研究課題名
バイオテクノロジーによるワクチンの創製と改良技術の開発
課題番号
H16-創薬-058
研究年度
平成18(2006)年度
研究代表者(所属機関)
松浦 善治(大阪大学)
研究分担者(所属機関)
- 森石 恆司(大阪大学微生物病研究所分子ウイルス分野)
- 鈴木 哲朗(国立感染症研究所ウイルス第2部)
- 伊丹 清馬(三菱ウェルファーマ株式会社)
研究区分
厚生労働科学研究費補助金 厚生科学基盤研究分野 政策創薬総合研究
研究開始年度
平成16(2004)年度
研究終了予定年度
平成18(2006)年度
研究費
4,500,000円
研究者交替、所属機関変更
-
研究報告書(概要版)
研究目的
水疱性口内炎ウイルス(VSV)のエンベロープ遺伝子を欠損させ、代わりにHCVのエンベロープ遺伝子を組み込んだ組換えVSV(HCVrv)を作製し、HCVの感染複製過程を解析し、その成績を基にした抗ウイルス剤や治療用ワクチンの開発を試みる。また、弱毒化されたワクチニアウイルスであるDIs株のワクチンベクターとしての有用性を検討するとともに、Cyclosporine A類似化合物のPPIase活性を指標にして、抗HCV薬の探索することを目的とする。
研究方法
1) HCVエンベロープ遺伝子を、VSVのエンベロープ遺伝子を欠損させたVSVのcDNAに挿入し、HCVrvを各種動物細胞で作製した。2) SARS-CoVの構造蛋白遺伝子を組み込んだ弱毒化ワクチニアウイルス(DIs)を取得した。3) PPIase活性阻害を指標にした抗HCV候補化合物をスクリーニングした。
結果と考察
1) HCVrvは293TやHuh7細胞で作製すると感染性を示すウイルスが得られ、これらのウイルスはHuh7細胞に最も高い感染性を示した。HCVrvの作製は37℃よりも、30℃で培養した方が高い感染価のウイルスが得られた。また、293TやHuh7細胞で作製したHCVrvは、抗hCD81抗体やC型肝炎患者血清で中和された。さらに、Huh7細胞では感染の拡大が観察された。2) SARS-CoVの構造蛋白を発現する各種組換えDIsを経鼻あるいは皮下接種されたマウスはSARS-CoVを認識する抗体が誘導されていた。SARS-CoVのS蛋白質を発現する組換えウイルスを接種されたマウス血清は、in vitroでSARS-CoVの感染を中和した。この組換えDIsは、重症肺炎のモデルマウスに接種した場合、発症を完全に抑制する効果があることが示され、ワクチンとして極めて有効であることが証明された。3) PPIase活性の阻害を指標にして化合物を評価したが、阻害活性を示す化合物は確認できなかった。
結論
1) 自立増殖可能なHCVrvは、各種遺伝子型のHCVの感染機構の解析に有用である。2) SARS-CoVのS蛋白を発現するDIsは重症肺炎モデル系で発症を完全に抑制することから、ワクチンとして極めて有効である。3) PPIase活性を阻害する化合物は確認できなかった。
公開日・更新日
公開日
2007-04-02
更新日
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