文献情報
文献番号
200501106A
報告書区分
総括
研究課題名
抗毒素製剤の効率的製造方法の開発に関する研究
課題番号
H16-医薬-075
研究年度
平成17(2005)年度
研究代表者(所属機関)
高橋 元秀(国立感染症研究所細菌第二部)
研究分担者(所属機関)
- 佐々木次雄(国立感染症研究所細菌第二部)
- 岩城正昭(国立感染症研究所細菌第二部)
- 野崎周英(財)化学及び血清療法研究所 第一研究部)
- 黒澤良和(藤田保健衛生大学総合医科学研究所免疫学部門)
- 向本雅郁(大阪府立大学大学院生命環境科学研究科獣医学専攻)
- 千葉 丈(東京理科大学 基礎工学部 基礎工学研究科)
研究区分
厚生労働科学研究費補助金 健康安全確保総合研究分野 医薬品・医療機器等レギュラトリーサイエンス総合研究
研究開始年度
平成15(2003)年度
研究終了予定年度
平成17(2005)年度
研究費
12,600,000円
研究者交替、所属機関変更
-
研究報告書(概要版)
研究目的
現行のウマ抗毒素抗体であるボツリヌスウマ抗毒素および人血液由来の破傷風免疫グロブリン製剤に替わる安全で高い中和力価を持つヒト型抗体の開発を目指し、短期間で大量の製剤を製造するための基礎的研究を行うものである。
研究方法
ヒト化マウスモノクローナル抗体やハイブリドーマ法により作製された完全ヒトモノクローナル抗体などと、染色体改変(ヒト抗体産生)マウスを用いて作製されたポリクローナル抗体の有効性を毒素中和能試験により高い力価を有する抗体組み合わせの検討を行った。また、抗毒素製剤の品質管理に用いるフロキュラシオン法は、従来の抗原抗体複合体の形成を肉眼観察から機器利用(レーザー粒径測定型デバイス)による自動化を検討した。
結果と考察
ボツリヌス毒素対する人型抗体では、ヒト化マウスモノクローナル抗体法で得られた抗Eおよび抗A型キメラ抗体のH鎖とL鎖のシャッフル発現実験を行った結果、組み合わせにより結合活性、中和活性が認められた。また、A型ボツリヌストキソイド免疫人リンパ球から作製した抗体ライブラリーからボツリヌス毒素に対する中和活性を示す2種の抗体を得たが、ヒトIgGに変換・混合により中和能の増強は認められたが、完全中和は確認されなかった。
破傷風毒素に対する完全型ヒト抗体産生トランスクロモマウスから得られたヒトモノクローナル抗体も単独よりも数種の組み合わせにより中和活性の上昇が認められた。
フロキュラシオン法による抗原・抗体の定量法の改良は、レーザー粒径測定型デバイスを用いる事により、(1)高い客観性、(2)測定時間の短縮、(3)測定結果の数値化・統計処理による高い定量性を達成することができた。今後、製造・品質管理の現場での応用・活用が期待される。
破傷風毒素に対する完全型ヒト抗体産生トランスクロモマウスから得られたヒトモノクローナル抗体も単独よりも数種の組み合わせにより中和活性の上昇が認められた。
フロキュラシオン法による抗原・抗体の定量法の改良は、レーザー粒径測定型デバイスを用いる事により、(1)高い客観性、(2)測定時間の短縮、(3)測定結果の数値化・統計処理による高い定量性を達成することができた。今後、製造・品質管理の現場での応用・活用が期待される。
結論
ボツリヌス毒素はバイオテロに使用されることも警告されており、緊急時に適当な予防策はない。そのため、毒素を中和する抗毒素抗体による治療は不可欠と考える。本基礎的研究の成果を基盤にして、短期間で大量の製剤を恒常的に製造するための検討がさらに必要である。
公開日・更新日
公開日
2007-04-09
更新日
-