食品からの食中毒起因菌の高感度迅速検出法の開発とリスクマネージメントへの応用

文献情報

• 文献番号: 200500909A
• 報告書区分: 総括
• 研究課題名: 食品からの食中毒起因菌の高感度迅速検出法の開発とリスクマネージメントへの応用
• 課題番号: H16-創薬-052
• 研究年度: 平成17(2005)年度
• 研究代表者(所属機関): 山本 茂貴(国立医薬品食品衛生研究所 食品衛生管理部)

研究分担者(所属機関)

• 五十君　靜信(国立医薬品食品衛生研究所　食品衛生管理部)
• 天野　富美夫(大阪薬科大学　薬学部)
• 池袋　一典(東京農工大学　工学部)
• 矢内原　千鶴子(矢内原研究所)
• 大田　博昭(シーエーエフラボラトリーズ　研究所)

• 研究区分: 厚生労働科学研究費補助金 健康安全確保総合研究分野 創薬等ヒューマンサイエンス総合研究
• 研究開始年度: 平成16(2004)年度
• 研究終了予定年度: 平成18(2006)年度
• 研究費: 6,900,000円
• 研究者交替、所属機関変更: -

研究報告書（概要版）

研究目的

食品および環境中の食中毒起因菌の検出に有効な抗原あるいはマーカーとなる遺伝子を特定し、これを利用した高感度迅速検出法を開発し、食中毒起因菌のリスクマネージメントへの応用を検討し、食品および環境中における当該微生物の制御に関する方向性を見いだす。

研究方法

検査の迅速化の方法としては、菌に特異的な抗原を利用する免疫学的な検出と、菌の遺伝子を利用する検出の２つの手法につき検討を行った。当該抗原の免疫学的検出法としては、矢内原らが抗体作成にあたり、遺伝子を用いた迅速検査法のシステム開発は池袋らが担当した。検査の標的とする抗原並びに遺伝子の検討は、山本、五十君、天野らが担当し、特異的な抗原の選定および、感染論に根ざした病原性に重要で新奇な機能を持つタンパク質の検討を行った。これらの結果として得られる迅速検討法をリスクマネージメントに応用する現場での検討は、養鶏場を持つ大田らが担当した。

結果と考察

サルモネラとカンピロバクター等の病原性、環境抵抗性などの因子の解析により、新奇の病原因子と重要な環境抵抗因子を発見し、それぞれの菌における病原性や環境抵抗性に関する基礎的知見を得た。サルモネラの新たな病原因子であるSEp22については、ノックアウト株を作成し、その病原メカニズムの解析を行った。これらの因子は食品衛生上リスクの高いと思われる菌群を特定するマーカーとなることから、これらを標的とし、菌の検出に有効な特異的抗体作成を行い、検出用の遺伝子配列を決定した。黄色ブドウ球菌では、エンテロトキシンに対するモノクローナル抗体の作成を行い、ペーパークロマト法に用いた。
遺伝子を用いた高感度検出システムとしては、一本鎖DNA結合タンパクと耐熱性グルコース脱水素酵素複合体を用いて、電気化学的に検出するセンサーの検討を試みた。迅速検出に向いている蛍光偏光法や装置の小型化・簡素化に最適な電気化学的方法についても検討を行った。リスクマネージメントへの応用の検討は、従来の培養による検査法によるリスク管理に加え、迅速法も併用した。

結論

サルモネラとカンピロバクターの病原性や環境抵抗性に関わる新奇な機能を持つ因子を特定し、その機能を明らかにした。この因子をマーカーとし、抗体および遺伝子配列を利用した高感度迅速検出法を開発し、食品衛生上特に制御の必要と思われる菌群の検出法を提供し、当該菌群のリスクマネージメントへの応用を検討した。

公開日・更新日

• 公開日: 2006-04-12
• 更新日: -