文献情報
文献番号
200500656A
報告書区分
総括
研究課題名
食品由来のウイルス性感染症の検出法の高度化、実用化に関する研究
課題番号
H15-新興-013
研究年度
平成17(2005)年度
研究代表者(所属機関)
武田 直和(国立感染症研究所 ウイルス第二部)
研究分担者(所属機関)
- 田中 智之(堺市衛生研究所)
- 谷口 孝喜(藤田保健衛生大学医学部)
- 榮 賢司(愛知県衛生研究所微生物学部)
- 大瀬戸 光明(愛媛県立衛生環境研究所)
- 篠崎 邦子(千葉県衛生研究所)
- 斎藤 博之(秋田県衛生科学研究所)
- 松岡 由美子(熊本市環境総合研究所)
- 勢戸 祥介(大阪府立大学大学院)
- 西尾 治(国立感染症研究所)
- 岡 智一郎(国立感染症研究所)
- 白土 東子(国立感染症研究所)
研究区分
厚生労働科学研究費補助金 疾病・障害対策研究分野 新興・再興感染症研究
研究開始年度
平成15(2003)年度
研究終了予定年度
平成17(2005)年度
研究費
13,200,000円
研究者交替、所属機関変更
-
研究報告書(概要版)
研究目的
患者便、血清、環境からの下痢症ウイルス抗原検出において、迅速性、簡便性、効率の向上を計る。
原因食品からの下痢症ウイルス抗原定量法を確立する。検査材料別に下痢症ウイルス検査法を確立しその検出限界を明らかにする。
原因食品からの下痢症ウイルス抗原定量法を確立する。検査材料別に下痢症ウイルス検査法を確立しその検出限界を明らかにする。
研究方法
組換えバキュロウイルスを用いてノロウイルス(NoV)中空粒子(VLPs)を作製し、単クローン抗体およびポリクローン抗体を用いたNoV抗原検出ELISA を構築した。ジェノグループI(GI)、GIIを特異的に認識する単クローン抗体を用いイムノクロマト診断キットを構築した。NoV VLPsを抗原としたELISAでNoVの血清疫学を行った。SSCP解析を活用してNoVを同定した。A、B、Lea、Leb型抗原とNoV VLPsとの結合をELISAで測定した。動物細胞でSaV VLPsを作製した。VP6の共通抗原に反応する単クローン抗体を用いて、血清中のVP6をELISAで検出した。
結果と考察
GI で 6株、GIIで 20株、合計26株の抗原および抗血清を作製した。血清学的にはGIで6種、GII で12種、計18種である。NoV抗原検出ELISAが実用の域に達した。NoV VLPsと抗血清の成績を基に、迅速かつ簡便なNoV診断ICキットを構築した。分子疫学研究から、GIIが流行の主役であること、わが国でもGII/4 に遺伝子の変化が起こっていることが示された。NoVを多数解析するうえでのSSCPの有効性を明らかにし、井戸水に起因する食中毒事例を解析した。NoVの結合には型物質が重要であるが、型物質以外の因子を必要とするNoVもあることを示した。動物細胞を用いてSaV VLPsを効率よく作製する方法を確立した。ELISAによるロタウイルス抗原検出法を確立した。
結論
NoV抗原検出ELISAを確立し、診断薬としての認可を得た。単クローン抗体を用いNoVイムノクロマト診断キットを構築した。感度、特異性についてデータを集め、実用化を目指す。NoV GII/4 の遺伝子の変化と、老人施設、障害者施設、病院での集団発生の増加との関連性の可能性が推測された。NoVを多数解析するうえでのSSCPが有効であった。NoVの結合には型物質が重要であるが、型物質以外の因子を必要とするNoVもあった。環境からのNoVによる感染症・食中毒が急増している。井戸水などの原水が汚染される可能性がある。ヒトロタウイルス感染の急性期において、かなり普遍的に抗原血症が起きていることが明らかとなった。
公開日・更新日
公開日
2006-04-10
更新日
-