ＥＳ細胞由来神経細胞を用いた薬剤の神経毒性評価システムの開発と神経毒性関連遺伝子・タンパク質データーベース構築

文献情報

• 文献番号: 200500226A
• 報告書区分: 総括
• 研究課題名: ＥＳ細胞由来神経細胞を用いた薬剤の神経毒性評価システムの開発と神経毒性関連遺伝子・タンパク質データーベース構築
• 課題番号: H17-トキシコ-004
• 研究年度: 平成17(2005)年度
• 研究代表者(所属機関): 金村 米博(独立行政法人国立病院機構大阪医療センター)

研究分担者(所属機関)

• 角田　達彦(独立行政法人理化学研究所　遺伝子多型研究センター)
• 山崎　麻美(独立行政法人国立病院機構大阪医療センター)
• 和田　昭盛(神戸薬科大学　生命有機化学研究室)
• 岡野　栄之(慶應義塾大学　医学部生理学教室)
• 入江　康至(大阪大学大学医学系研究科　神経薬理学)

• 研究区分: 厚生労働科学研究費補助金 厚生科学基盤研究分野 萌芽的先端医療技術推進研究【トキシコゲノミクス分野】
• 研究開始年度: 平成17(2005)年度
• 研究終了予定年度: 平成19(2007)年度
• 研究費: 39,000,000円
• 研究者交替、所属機関変更: -

研究報告書（概要版）

研究目的

難治性神経疾患に対する有効かつ安全な薬剤開発を効率化する支援技術として、ES細胞を用いた薬剤安全性の高感度評価システムの開発と毒性関連遺伝子・タンパク質データーベースの構築を目指す。

研究方法

１）安全性評価用基準神経細胞の確立として、各種神経細胞の分化誘導技術開発、細胞の生物学的特性評価、安全性試験用培養技術の開発を行う。
２）正常神経細胞に対する薬剤毒性情報の取得・データーベース化として、１次スクリーニング（株化細胞）、２次スクリーニング（動物ES細胞由来正常神経細胞）、３次スクリーニング（ヒトES細胞由来正常神経細胞）の３段階で各種薬剤の毒性評価を行い、その情報をデーターベース化する。
３）正常神経細胞に対する薬剤毒性に関連する遺伝子・タンパク質発現情報の包括的取得は、マイクロアレーと定量的PCR法、プロテインチップ法を用いて実施する。
４）薬剤毒性関連遺伝子・タンパク質情報のデーターベース化と、毒性関連遺伝子ネットワークの同定を行なう。

結果と考察

今年度は主に１次スクリーニング開始を目指した研究を行い、マウス由来ドーパミン作動性神経細胞と４種類のヒト株化細胞を用いての１次スクリーニングが開始され、一部、毒性関連遺伝子探索も開始した。毒性評価用プロトコール作製もほぼ終了し、今後、これら細胞を用いた１次スクリーニングを本格的に実施する準備は整ったと思われる。２次スクリーニングに使用するマウスES細胞由来神経系細胞に関しては、細胞作製プロトコールの検討を開始している。次年度はそれに加え、毒性試験用のプロトコールを構築し、早期に２次スクリーニングを開始できる体制を整えたいと考える。さらにヒトES細胞を用いた研究も一部開始した。またマイクロアレーを用いた遺伝子発現情報を機能分類あるいはパスウェイ（遺伝子ネットワーク）という群としての変動を捉えられるシステムの開発に成功している。次年度以降、１次・２次スクリーニングで上がってくる解析結果を元に、具体的に複数の薬剤の毒性関連遺伝子のデーターベース構築し、その毒性関連遺伝子ネットワークを同定して行きたいと考える。

結論

１次スクリーニングが開始でき、２次スクリーニング開始の準備ができたと考え、概ね計画通り進行したと考える。次年度は２次スクリーニングを開始し、最終目標のヒトES細胞を用いた３次スクリーニング系の早期の構築を目指したい。

公開日・更新日

• 公開日: 2006-04-07
• 更新日: -